RPMI 1640 Médio (Roswell Park Memorial Institute)

O meio de cultura Rpmi-1640 foi originalmente projetado especificamente para cultura de linfócitos e agora é amplamente utilizado na cultura de uma variedade de células normais e cancerosas, incluindo células HeLa, células Jurkat, células McF-7, células PC12, células PBMC, astrócitos e câncer células. É uma das mídias mais utilizadas. O efeito único do meio RPMI RPMI 1640 em comparação com outros meios se deve ao fato de conter o agente redutor glutationa e uma alta concentração de vitaminas. O meio de cultura RPMI 1640 contém biotina, vitamina B12 e PABA, que não são encontrados em Eagle's MEM e DMEM.

Ingredientes do Meio RPMI 1640

L-glutamina (Glutamina)

A L-glutamina (Glutamina) é um elemento nutriente essencial na cultura de células, mas é instável em solução e se degradará espontaneamente. A quantidade de L-glutamina pode ser ajustada arbitrariamente de acordo com as necessidades de pesquisa do meio sem L-glutamina, e a adição de L-glutamina fresca ou seus substitutos no momento do uso é mais benéfica para o crescimento celular.

A L-alanil-L-glutamina (Ala-Glu), também conhecida como alanil-glutamina e alanil-glutamil dipeptídeo, é um aditivo avançado de cultura de células que pode substituir diretamente a L-glutamina no meio de cultura de células. A L-Glutamina é um nutriente essencial em cultura de células, mas é instável em solução e, no entanto, é instável em solução e se degrada espontaneamente para produzir amônia e ácido piroglutâmico, dos quais a amônia é prejudicial às células, enquanto a L-alanil- A L-glutamina é muito estável em solução aquosa e não se degrada espontaneamente. O mecanismo de utilização celular é que durante a cultura celular, as células irão liberar gradualmente uma peptidase no meio de cultura para hidrolisar L-alanil-L-glutamil em L-alanina e L-glutamina, e então as células irão absorver e utilizar essas duas hidrólises. produtos. O processo de utilização celular de L-alanil-L-glutamil é semelhante à estratégia de cultura por adição em fluxo, em que baixos níveis de L-glutamina são adicionados continuamente ao meio de cultura, aumentando assim a utilização de L-glutamina sem gerar excesso amônia, que é mais propícia ao crescimento celular. O L-alanil-L-glutamil pode substituir a L-glutamina equimolar, é adequado para todas as células, requer pouca adaptação e pode prolongar o tempo de cultivo celular. Também pode prolongar o tempo de cultura de células e reduzir o número de passagens, o que economiza tempo e dinheiro. Células cultivadas em meio suplementado com L-glutamina apresentaram redução mais lenta da atividade do que aquelas cultivadas em meio suplementado com L-glutamina. O período de atraso ligeiramente mais longo é devido ao tempo necessário para a liberação da peptidase e digestão do dipeptídeo.

NEAA (Aminoácidos Não Essenciais)

NEAA (Aminoácidos Não Essenciais), que são 7 NEAAs de L-alanina, L-ácido glutâmico, L-asparagina, L-ácido aspártico, L-prolina, L-serina e glicina adicionados ao meio MEM, podem reduzir o lado efeitos da própria produção das células de aminoácidos não essenciais durante a cultura de células e promover efetivamente a proliferação e o metabolismo celular.

A glicose pode ser ajustada à vontade de acordo com as necessidades de pesquisa, o que é conveniente e rápido. O meio com alto teor de açúcar é comumente usado para células de crescimento rápido com baixa adesão, células de mieloma de hibridoma, células clonais, células transformadas de transfecção de DNA, várias células hospedeiras de vírus primários, cultura de células únicas e produção de vacinas, como o uso de Células CHO para expressar EPO e produção de vacina contra hepatite B. O meio com baixo teor de açúcar é mais adequado para a cultura de células dependentes aderentes de metabolização mais lenta.

HEPES é um excelente tampão biológico, que não tem efeito tóxico nas células. O meio com HEPES pode manter uma faixa de pH constante por um longo período de tempo, o que pode efetivamente impedir que o crescimento celular seja afetado negativamente por grandes flutuações de pH do meio de cultura. Pode ser usado em incubadoras sem CO2.

O vermelho de fenol é usado como indicador de PH no meio de cultura para monitorar continuamente o pH do meio de cultura. O vermelho de fenol torna o meio de cultura amarelo em PH baixo e roxo em PH mais alto e vermelho em PH 7.2 ~ 7.4, que é mais adequado para cultura de células. No entanto, o vermelho de fenol também tem algumas desvantagens. Estudos mostraram que o vermelho de fenol pode imitar os efeitos dos hormônios esteróides (especialmente o estrogênio), portanto, ao usar células sensíveis ao estrogênio (como tecido mamário), é melhor usar um meio sem vermelho de fenol. O vermelho de fenol pode interferir na detecção durante a análise de citometria de fluxo. Além disso, a presença de vermelho de fenol em algumas formulações de meio sem soro pode interferir no equilíbrio sódio-potássio.

Solução de penicilina-estreptomicina

A mistura penicilina-estreptomicina, também comumente chamada de “antibióticos duplos”, é o antibiótico mais comumente usado em cultura in vitro para prevenir a contaminação microbiana, na qual a penicilina interfere na síntese da parede celular bacteriana e é particularmente eficaz contra bactérias Gram-positivas, enquanto A estreptomicina inibe a síntese proteica bacteriana ligando-se à subunidade 30S do ribossomo bacteriano e é particularmente eficaz contra a estreptomicina liga-se à subunidade 30S do ribossomo bacteriano e inibe a síntese proteica bacteriana, que é eficaz contra bactérias Gram-negativas e Gram-positivas, mas é particularmente eficaz contra bactérias Gram-negativas. A combinação de penicilina e estreptomicina pode prevenir a maior parte da contaminação bacteriana.

Este produto contém aminoácidos, vitaminas, sais inorgânicos e muitos outros componentes necessários para a multicultura de células, mas não contém proteínas, lipídios ou quaisquer fatores de crescimento, portanto, o produto deve ser usado com soro ou aditivos sem soro.

Cuidados

Este produto foi filtrado e desbacterizado e deve ser usado com cuidado para operação asséptica para evitar contaminação.
Não congele-descongele o produto para manter o melhor uso do produto.
Este produto destina-se apenas a pesquisas científicas ou estudos adicionais, não para diagnóstico ou tratamento.