Meio Essencial Mínimo em Pó (MEM)

O RPMI-1640 é um meio McCoy's 5A melhorado e tem um efeito único em comparação com outros meios porque contém o agente redutor glutationa e uma alta concentração de vitaminas. RPMI 1640 contém biotina, vitamina B12 e PABA, que não são encontrados no Eagle's MEM e DMEM. Além disso, o meio contém concentrações muito altas das vitaminas inositol e colina. Verificou-se que o meio RPMI 1640 é adequado para uma variedade de células de mamíferos, incluindo células HeLa, células jurkat, células MCF-7, células PC12, células PBMC, astrócitos e células cancerígenas, é um dos meios mais amplamente utilizados.RPMI 1640 meio não contém proteínas, lipídios ou fatores de crescimento. Portanto, geralmente requer 10% de soro fetal bovino (FBS) como suplementação. O RPMI 1640 usa um sistema tampão de bicarbonato de sódio (2.0 g/L) e, portanto, requer um ambiente de 5-10% de CO2 para manter o pH fisiológico. Para uma ampla gama de aplicações de cultura de células, oferecemos meio modificado RPMI 1640 com vários componentes e meio RPMI 1640 com componentes personalizáveis.

Ingredientes do meio RPMI-1640 em pó

Este meio de pó seco RPMI-1640 precisa ser suplementado com bicarbonato de sódio, pH ajustado e filtrado durante a preparação. O método de formulação detalhado é o seguinte:

1. Adicione 950 mL de água destilada a um recipiente de mistura o mais próximo possível do volume final.
2. Adicione o meio seco à temperatura ambiente (15°C a 30°C) e mexa delicadamente. Não aqueça a água.
3. Enxágue o interior da embalagem para remover qualquer resíduo de pó.
4. Adicione 29.3 mL de solução de NaHCO75 3 g/L ao meio.
5. Ajuste o pH para 0.2 a 0.3 unidades abaixo do pH de trabalho final desejado adicionando lentamente e agitando 1 N NaOH ou 1 N HCl. O pH pode subir de 0.1 a 0.3 unidades após a filtração. O pH de trabalho recomendado é 7.1-7.4.
6. Ajuste o volume final com água destilada.
7. Processe imediatamente o meio através da função de filtração por membrana de um filtro de 0.2 μm em um recipiente estéril usando um sistema de pressão positiva.