Meio M199 em pó

O M199 é especialmente adequado para a cultura de células não transformadas e também é comumente usado em virologia, produção de vacinas e cultura in vitro de explantes primários de células epiteliais pancreáticas de rato e tecido cristalino de camundongo. Comparado com outros meios basais, o M199 contém componentes únicos, incluindo adenina, adenosina, hipoxantina, timina e outras vitaminas. O M199 tem duas composições de sal equilibradas, a composição de sal de Earle é comumente usada em ambiente de CO2, a composição de sal de Hank é usada em ambiente sem CO2. O meio 199 não contém proteínas, lipídios ou fatores de crescimento. O meio 199 usa um sistema tampão de bicarbonato de sódio (2.2 g/L) e, portanto, requer um ambiente de 5 a 10% de CO2 para manter o pH fisiológico. Para uma ampla gama de aplicações de cultura de células, fornecemos mídia M199 modificada com vários componentes, bem como mídia M199 com componentes personalizáveis.

Ingredientes do Meio M199 em Pó

Este meio de cultura celular em pó seco M199 precisa ser suplementado com bicarbonato de sódio, ajustado para pH e filtrado durante a preparação. O esquema de preparação detalhado é o seguinte:

1. Adicione 950 mL de água destilada a um recipiente de mistura o mais próximo possível do volume final.
2. Adicione o meio seco à temperatura ambiente (15°C a 30°C) e mexa delicadamente. Não aqueça a água.
3. Enxágue o interior da embalagem para remover qualquer resíduo de pó.
4. Adicione 29.3 mL de solução de NaHCO75 3 g/L ao meio.
5. Ajuste o pH para 0.2 a 0.3 unidades abaixo do pH de trabalho final desejado adicionando lentamente e agitando 1 N NaOH ou 1 N HCl. O pH pode subir de 0.1 a 0.3 unidades após a filtração. O pH de trabalho recomendado é 7.1-7.4.
6. Ajuste o volume final com água destilada.
7. Processe imediatamente o meio através da função de filtração por membrana de um filtro de 0.2 μm em um recipiente estéril usando um sistema de pressão positiva.