Meio MEM α em Pó (Meio Essencial Mínimo α)

MEM α pode ser usado com uma variedade de suspensões e células de mamíferos aderentes, incluindo queratinócitos, astrócitos primários de rato e células de melanoma humano. O MEM α também está disponível em uma versão sem nucleosídeos e pode ser usado como meio de seleção para DG44 e outras células DHFR negativas. Este produto é feito com sais balanceados de Earle. MEM alfa não contém proteínas, lipídios ou fatores de crescimento. Portanto, o MEM α requer suplementação, geralmente com 10% de soro fetal bovino (FBS). O MEM α usa um sistema tampão de bicarbonato de sódio (2.2 g/L) e, portanto, requer um ambiente de 5-10% de CO2 para manter o pH fisiológico. Para uma ampla gama de aplicações de cultura de células, oferecemos mídia MEM α modificada em uma variedade de composições, bem como mídia MEM α com composições personalizadas.

Ingredientes do meio MEM α em pó

Este meio de cultura celular em pó seco MEM α é formulado com suplementação de bicarbonato de sódio, ajuste de pH e filtração. O esquema de preparação detalhado é o seguinte:

1. Adicione 950 mL de água destilada a um recipiente de mistura o mais próximo possível do volume final.
2. Adicione o meio seco à temperatura ambiente (15°C a 30°C) e mexa delicadamente. Não aqueça a água.
3. Enxágue o interior da embalagem para remover qualquer resíduo de pó.
4. Adicione 29.3 mL de solução de NaHCO75 3 g/L ao meio.
5. Ajuste o pH para 0.2 a 0.3 unidades abaixo do pH de trabalho final desejado adicionando lentamente e agitando 1 N NaOH ou 1 N HCl. O pH pode subir de 0.1 a 0.3 unidades após a filtração. O pH de trabalho recomendado é 7.1-7.4.
6. Ajuste o volume final com água destilada.
7. Processe imediatamente o meio através da função de filtração por membrana de um filtro de 0.2 μm em um recipiente estéril usando um sistema de pressão positiva.